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薄层色谱仪的基本操作方式是什么

时间:2015-03-12

薄层色谱仪广泛应用于科研与生产领域,对于首次接触的使用者,我们来介绍下薄层色谱仪的基本操作方式是什么。
 
(1) 薄层色谱仪薄层板制备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合, 去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动薄层色谱仪涂布器进行涂布(厚度为0.2~ 0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟,即置 有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。 

 
(2)点样除另有规定外,用薄层色谱仪点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底 边2.0cm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 
 
(3)展开展开缸如需预先用展开剂饱和,可在薄层色谱仪缸中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封薄层色谱 仪缸顶的盖,使系统平衡或 按正文规定操作。 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5 ~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封缸盖,待展开至规定距离(一般为10~15cm), 取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。 
 
(4)如需用薄层色谱仪的薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层色谱仪薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。 薄层扫描的方法,除另有规定外,可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明, 结合具体情况,选择吸收法或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层色谱仪的薄层扫描结果的因素很多,故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性 的情况下,将供试品与 对照品在同一块薄层上展开后扫描,进行比较并计算定量,以减少误差。各种供试品, 只有得到分离度和重现性好的薄层色谱,才能获得满意的结果。
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